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Was zeichnet Phosphatpuffer aus? Da Phosphorsäure drei saure Protonen enthält, hat sie mehrere Dissoziationskonstanten und kann verwendet werden, um Puffer für einen der drei entsprechenden pH-Werte zu erzeugen.
Die drei pKa-Werte für Phosphorsäure (aus dem CRC Handbook of Chemistry and Physics) sind 2. 16, 7. 21 und 12. 32. Mononatriumphosphat und seine konjugierte Base, Dinatriumphosphat, werden üblicherweise zur Erzeugung von pH-Puffern verwendet. Werte um 7, für biologische Anwendungen, wie hier gezeigt.
Diesen Puffer zu erstellen ist etwas schwieriger als das Erstellen von TAE- und TBE-Puffern. Es ist jedoch nicht extrem hart. Einfach durchschnittlich. Es sollte etwa 10 Minuten dauern, bis dieser Puffer aufgepumpt ist. Hier ist wie.
1. Entscheiden Sie sich für die Puffereigenschaften
Bevor Sie einen Puffer erstellen, sollten Sie zuerst wissen, welche Molarität Sie wünschen, welche Menge Sie herstellen sollen und welchen pH-Wert Sie wünschen. Die meisten Puffer funktionieren am besten bei Konzentrationen zwischen 0,1 M und 10 M. Der pH-Wert sollte innerhalb von 1 pH-Einheit der Säure / Konjugat-Base pKa liegen. Der Einfachheit halber wird diese Beispielberechnung für 1 Liter Puffer durchgeführt.
2. Bestimmen Sie das Verhältnis von Säure zu Base
Verwenden Sie die Henderson-Hasselbalch-Gleichung (unten), um zu bestimmen, welches Verhältnis von Säure zu Base erforderlich ist, um einen Puffer mit dem gewünschten pH herzustellen. Verwenden Sie den pKa-Wert, der Ihrem gewünschten pH-Wert am nächsten liegt, und das Verhältnis bezieht sich auf das Säure-Base-Konjugatpaar, das diesem pKa entspricht.
HH Gleichung: pH = pKa + log (Base / Säure)
Für einen Puffer von pH 6, 9, Base / Acid = 0. 4898
Ersatz für Säure und Lösung für Base
Die gewünschte Molarität des Puffers ist die Summe von Säure + Base.
Für einen 1 M Puffer, Base + Acid = 1 und Base = 1 - Acid
Durch Einsetzen dieser in die Verhältnisgleichung aus Schritt 2 erhalten Sie: < Säure = 0. 6712 mol / L
Lösung für Säure
Mit der Gleichung: Base = 1 - Säure können Sie Folgendes berechnen:
Base = 0 3288 Mol / L
3. Mischen Sie die Säure- und Konjugatbasis
Nachdem Sie die Henderson-Hasselbalch-Gleichung verwendet haben, um zu berechnen, welches Verhältnis von Säure zu Base für Ihren Puffer erforderlich ist, bereiten Sie unter 1 Liter Lösung die richtigen Mengen an Mononatriumphosphat und Dinatriumphosphat vor. ..
4. Überprüfen Sie den pH-Wert
Verwenden Sie eine pH-Sonde, um zu bestätigen, dass der korrekte pH-Wert für den Puffer erreicht ist. Nach Bedarf leicht mit Phosphorsäure oder Natriumhydroxid (NaOH) einstellen.
5. Korrigieren Sie die Lautstärke
Sobald der gewünschte pH-Wert erreicht ist, bringen Sie das Puffervolumen auf 1 Liter. Verdünnen Sie dann den Puffer wie gewünscht. Der gleiche Puffer kann verdünnt werden, um Puffer von 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M oder irgendetwas dazwischen zu erzeugen.
6. Tipps für den Puffer
Denken Sie daran, dass pKa nicht einfach auf einen exakten Wert gemessen werden kann.Etwas unterschiedliche Werte können in der Literatur aus verschiedenen Quellen verfügbar sein.
7. Was Sie brauchen
Um den Puffer herzustellen, benötigen Sie drei Substanzen, während die übrigen Materialien Ausrüstung sind. Die Substanzen sind Mononatriumphosphat, Dinatriumphosphat und Phosphorsäure oder Natriumhydroxid, um den pH einzustellen.
Außerdem benötigen Sie ein pH-Messgerät und eine Sonde sowie geeignete Labware. Dazu gehören ein Messkolben, Messzylinder, Bechergläser und Rührstäbe.
Zum Schluss benötigen Sie eine Rührkochplatte.
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